Цель: Проверить, может ли анализ единичных В-клеток из витреальной жидкости выявить важные геномные и клинико-патологические особенности, позволяющие различить пациентов с витреоретинальной лимфомой (ВРЛ) от пациентов с хроническим воспалением, используя тяжелые цепи иммуноглобулина (IGH), мутацию L265P8 белка Q88 миелоидной дифференцировки первичного ответа (MYD88L265P8), и профиль числа копий.
Дизайн: Ретроспективное исследование на базе одного центра
Методы: Для проведения молекулярного анализа был получен биоптат стекловидного тела от 7 пациентов с ВРЛ и 4 пациентов с хроническим воспалением. Образцы витреальной жидкости были зафиксированы, прошли цитологический анализ и иммуногистохимическое обследование. Единичные В-клетки были отобраны, после чего прошли геномный анализ. Для каждой отдельной В-клетки были проанализированы частота доминантных IGH, MYD88L265P8 и профиль числа копий генома.
Результаты: В среднем 10 из 13 В клеток были использованы для анализа IGH и MYD88. Частота доминантной IGH (88.8% ± 13.2%) и мутации MYD88L265P (35.0% ± 31.3%) была выше у пациентов с ВЛР, чем у пациентов с хроническим воспалением (65.9% ± 13.4% и 1.5% ± 2.6% для IGH и MYD88L265P, соответственно). В цитологически подтвержденном случае ВЛР все 15 В клеток из стекловидного тела произошли от одного клона со 100% парными IGH: последовательности легких цепей иммуноглобулина IGK. Полногеномное профилирование числа копий выявило высокую степень сходства между В-клетками одного и того же пациента с ВЛР, с обширными добавлениями и выпадениями в одних и тех же областях по всему геному. Кроме того, 14 из 15 В-клеток продемонстрировали транслокацию BCL2/JH t(14;18), подтверждающую клеточную малигнизацию клонального происхождения. Кластерный анализ профиля числа копий выявил, что малигнизированные В-клетки, полученные от разных пациентов с ВЛР не имеют общих геномных сигнатур.
Выводы: Геномный анализ одиночных В-клеток по IGH, мутации MYD88L265P и профиля числа копий позволяет поставить диагноз ВЛР. Поскольку в исследовании участвовала небольшая когорта, эти значимые подтверждающие данные данные требуют дальнейшего исследования в рамках более крупной когорты пациентов.
Источник: https://www.aaojournal.org/article/S0161-6420(20)31110-6/fulltext