Цель: Оценить цитотоксическое действие рекомбинантного тканевого активатора плазминогена альтеплазы и её компонентов на клетки пигментного эпителия человеческой сетчатки (hRPE).
Дизайн: Лабораторное исследование.
Методы: В рамках исследования был оценен цитотоксический эффект альтеплазы на клетки эмбрионального пигментного эпителия (hfRPE), пигментного эпителия, полученного путем индуцирования плюрипотентной стволовой клетки (hiPS-RPE) и на клеточную линию ARPE-19. Также оценивался цитотоксический эффект двух компонентов альтеплазы: L-аргинина и полисорбата 80 на клетки hfRPE. Кроме того давалась оценка влияния альтеплазы на трансэпителиальное сопротивление (TER) и продукцию клетками hfRPE эндотелиального фактора роста сосудов (VEGF) и пигментного фактора эпителиального происхождения (PEDF). Тип клеточной смерти, индуцируемой альтеплазой, определялся путем окрашивания гомодимером этидия III и FITC-аннексином V и методом TUNEL.
Результаты: Альтеплаза значительно снижала жизнеспособность клеток hfRPE и оказывала доза- и время зависимый эффект. Реакция клеток hiPS-RPE и ARPE-19 была аналогична клеткам hfRPE. Из компонентов только L-аргинин значительно снижал жизнеспособность клеток hfRPE. Альтеплаза (83 мкг/ мл, 6 ч) не оказывала значительного эффекта на продукцию VEGF и PEDF клетками hfRPE. Альтеплаза снижала показатель TER у клеток hiPS-RPE, оказывая доза- и время зависимый эффект, при этом типом клеточной смерти являлся некроз.
Выводы: Альтеплаза может быть цитотоксичен для клеток пигментного эпителия сетчатки человека, оказывая доза- и время зависимый эффект, при этом возможной причиной может являться L-аргинин.
Источник: https://link.springer.com/article/10.1007/s10384-021-00848-2